外泌體早發(fā)現(xiàn)于體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中，是細(xì)胞主動(dòng)分泌，大小較為均一，直徑為30~100納米，密度1.10~1.18 g/ml的囊泡樣小體。隨著分子技術(shù)的不斷發(fā)展，生物學(xué)界對(duì)外泌體的探索日趨深入。2013年，三位國(guó)外科學(xué)家因在細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的研究上取得關(guān)鍵性突破，被授予諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。由此，外泌體的研究達(dá)到了一個(gè)的高度。

　　而近年來(lái)，越來(lái)越多的證據(jù)顯示出外泌體對(duì)臨床治療的重要價(jià)值。外泌體是細(xì)胞間信使，通過(guò)其數(shù)量和生物化學(xué)組成的變化，可為進(jìn)一步的臨床診斷提供有力的證據(jù)。它攜帶多種蛋白質(zhì)和miRNA，參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞遷移、血管新生和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)等過(guò)程，并且有可能成為藥物的天然載體，應(yīng)用于腫瘤檢測(cè)或臨床治療。

　　但目前國(guó)內(nèi)在外泌體研究方面的經(jīng)驗(yàn)十分有限，無(wú)論是離心法、過(guò)濾離心還是免疫磁珠法，都無(wú)法同時(shí)外泌體的含量、純度以及生物活性。這首先就制約了外泌體樣本的制取，進(jìn)而對(duì)后續(xù)的表征造成困難。而測(cè)量技術(shù)的局限性也極大地阻礙了外泌體在這些領(lǐng)域的研究進(jìn)展。

　　在當(dāng)前中國(guó)市場(chǎng)主流的外泌體表征方法中，研究人員的選擇一般有電子顯微鏡、流式細(xì)胞儀和動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)。但電子顯微鏡一次只能觀測(cè)數(shù)量有限的顆粒，在代表性上存在嚴(yán)重不足，同時(shí)，由于電子顯微鏡的樣本制備過(guò)程比較復(fù)雜，因此很容易造成樣本的形態(tài)、狀態(tài)發(fā)生改變；流式細(xì)胞儀目前*的測(cè)量顆粒粒徑下限為300nm左右，大大超過(guò)了外泌體的粒徑上限；而動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)不適合多分散的復(fù)雜外泌體樣本的測(cè)量，且無(wú)法得出樣品中外泌體的濃度。

　　　的質(zhì)控作用

　　外泌體的提取一直以來(lái)都是橫亙?cè)谒邢嚓P(guān)研究者面前的一道難題。生物細(xì)胞中的囊泡種類繁多，怎樣證明提取的顆粒一定就是外泌體呢？電子顯微鏡在鑒定一定數(shù)量的顆粒屬性方面固然有效，但如前所述，電子顯微鏡不適合對(duì)顆粒進(jìn)行快速分析，而動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)又只能對(duì)分布相對(duì)均一的樣本顆粒進(jìn)行檢測(cè)，并且不具備熒光功能。

　　同時(shí)，研究人員還可以利用熒光標(biāo)定重點(diǎn)的特定外泌體顆粒，從四種不同波長(zhǎng)——405nm、 488nm、 532nm和635nm——的激光器中選擇一款，搭配相應(yīng)的濾光片，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)熒光樣品的測(cè)量，再由NTA技術(shù)對(duì)其進(jìn)行單獨(dú)檢測(cè)，免受復(fù)雜樣本（如血清、尿液等）環(huán)境的影響。對(duì)復(fù)雜樣品的分辨能力對(duì)于像外泌體這樣的研究對(duì)象來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。

　　尤為關(guān)鍵的是，由于NTA的工作原理是通過(guò)將一束能量集中的激光穿過(guò)玻璃棱鏡對(duì)樣品（懸浮顆粒的溶液）進(jìn)行照射，配以玻璃表面鍍鉻使背景信號(hào)小化，可讓研究人員通過(guò)顯微鏡直接觀察到納米顆粒在溶液中的布朗運(yùn)動(dòng)，并拍攝影像，對(duì)每個(gè)顆粒的布朗運(yùn)動(dòng)進(jìn)行追蹤和分析，快速地計(jì)算出樣本中納米顆粒的流體力學(xué)半徑和濃度。相對(duì)于其他傳統(tǒng)技術(shù)，NTA能對(duì)懸浮液中粒徑范圍為10nm-2000nm的顆粒進(jìn)行表征，并且兼具*的分辨率，對(duì)于粒度較為接近的顆粒仍然可以分析，特別適用于外泌體、蛋白質(zhì)聚集、藥物傳輸、納米顆粒毒理、病毒和疫苗等復(fù)雜體系的相關(guān)研究。

　　操作簡(jiǎn)便、工作效率高

　　通常，大型儀器（如流式細(xì)胞儀）在使用前都需要進(jìn)行復(fù)雜的預(yù)熱和校準(zhǔn)準(zhǔn)備。并且由于NTA技術(shù)采用的是斯托克斯-愛(ài)因斯坦方程的計(jì)算，所提供的是一個(gè)無(wú)關(guān)質(zhì)量、折光度和顆粒材料的流體力學(xué)直徑，因此儀器可跳過(guò)繁瑣的校準(zhǔn)直接進(jìn)入研究分析，為工作人員節(jié)省研究前的時(shí)間。

　　作為一種集成程度和自動(dòng)化程度都非常高的儀器，還整合了顆粒檢測(cè)功能與納米顆粒分析技術(shù)，為納米顆粒表征提供易于使用的可重復(fù)平臺(tái)。40cm x 25cm的設(shè)備主機(jī)集成了超高靈敏度科研級(jí)sCMOS光電傳感器、溫控單元和一個(gè)具有四種可選波長(zhǎng)的激光。樣品池和激光模塊也能輕易的拆卸和組裝，便于移動(dòng)、清潔，適合高通量檢測(cè)。強(qiáng)大的軟件分析能力讓馬爾文NS 300在極短的時(shí)間內(nèi)就能繪制出粒徑—對(duì)應(yīng)數(shù)量分布強(qiáng)度—顆粒散射光強(qiáng)的三維圖譜，并得出與各種粒徑顆粒有關(guān)的信息。這樣不僅減少了人為操作失誤的概率，更大大提高了研究人員的工作效率。

　　增值服務(wù)保障產(chǎn)品*狀態(tài)

　　作為顆粒物表征技術(shù)的市場(chǎng)，除了技術(shù)創(chuàng)新，也一貫注重客戶服務(wù)，其技術(shù)團(tuán)隊(duì)人數(shù)是銷售團(tuán)隊(duì)的3倍，涵蓋了學(xué)術(shù)級(jí)、應(yīng)用和服務(wù)工程師等，他們會(huì)參與客戶的研究工作，深入了解客戶需求，為其提升產(chǎn)品價(jià)值。

　　總結(jié)與展望

　　　雖然外泌體作為生物標(biāo)志物的研究在國(guó)內(nèi)尚處于起步階段，但它在臨床治療領(lǐng)域已顯現(xiàn)出巨大的發(fā)展?jié)摿?。在臨床診斷中，簡(jiǎn)單快速地在復(fù)雜生物背景下測(cè)量外泌體濃度、粒徑是*要求，目前存在的方法都無(wú)法地解決這一問(wèn)題。NTA作為一項(xiàng)的測(cè)量技術(shù)，具有實(shí)時(shí)觀測(cè)和熒光測(cè)量功能，能夠以較高的分辨率，地測(cè)量顆粒濃度，從而為外泌體大小和濃度研究提供新的思路。而隨著越來(lái)越多科研機(jī)構(gòu)與研究項(xiàng)目成果的進(jìn)一步披露。